Serumun inaktivasyonu için serum şişesi nasıl kullanılır
Hücre büyümesi için gerekli bir besin maddesi olarak, hücre kültüründe serumun rolü aşikardır ve serumun kalitesi ve sterilliği de deneyin başarısını belirlemenin anahtarıdır. Peki, serum nasıl inaktive edilir? Bu, serum şişelerinin kullanılmasını gerektirir.
Serum inaktivasyon adımları aşağıdaki gibidir:
1. Kontrol şişesiyle aynı serum şişesine sahip bir şişe seçin, serumla aynı hacimde damıtılmış suyu kontrol şişesine dökün ve sıcaklığı ölçün.
2. Sıcaklık ayarı. Kontrol grubunun şişesine iki adet civa termometresi takınız ve su banyosuna yerleştiriniz. Termometre 56 dereceyi gösterdiğinde kalibrasyon su banyosunun sıcaklığını 56 dereceye ayarlayın.
3. Serum şişesi ve kontrol şişesini bir su banyosuna koyun, sıcaklığı 56 dereceye ayarlayın ve yarım saat su banyosu yapın. İnaktivasyondan sonra şişelere bölün, aseptik deneyler yapın ve -70--20 derecede saklayın.
4. Donmuş serumun rengini ve şeffaflığını gözlemlemek için eğer renk kırmızımsı veya çökelme ile daha açıksa bu serumun kalitesinin iyi olmadığı anlamına gelir, bu nedenle inaktivasyon için kaliteli bir serum seçilmesi gerekir. .
5. Serum kullanımı, serum kontaminasyonu olasılığını artıracak ve serum kalitesini düşürecek olan tekrarlanan çözülmelerden kaçınmalıdır. Tekrar tekrar çözülen serum çöktüğünde, bu, serumun mevcut olmadığı veya kalitesiz olduğu anlamına gelir.
6. Deney sonuçlarının stabilitesini sağlamak için, şişeyi bölerken serumun iyice çalkalandığından emin olun ve ardından şişeyi bölün ve tek tip değişkenler ilkesini sağlamak için aynı serumu kullanmaya çalışın.
Yukarıdakiler, serum şişeleri kullanılarak serum inaktivasyonunun spesifik adımlarıdır, ancak çoğu hücre kültüründe, serumun ısıyla inaktivasyonunun gerekli olmadığını belirtmekte fayda var. Çoğu durumda, ısıyla inaktivasyon hücre büyümesini iyileştirmez, bunun yerine serumu yok eder ve çökelmeyi artırır. Literatür, hücreler için inaktive edilmiş serum kullanımını göstermediği sürece, hücre kültürü için serum ısı inaktivasyon aşaması genellikle ihmal edilebilir.
