Hücre şekillendirme, hücre enjeksiyonu, şekillendirme ve elde etme adımlarını içerir. Hücre kültürü şişesindeki hücrelerin belli bir oranda büyümesi ve gelişmesi gerekir. Şu anda, şişenin dış duvarındaki hücreleri sindirmek ve sonra onu hissetmek için tripsin'e güvenmek gerekir. Enzimler söz konusu olduğunda, sindirim süresi kontrol edilmelidir.
T75 hücre kültürü şişesi
Tripsin, hücre kültürü şişelerine kaynaşmış hücre zarlarındaki proteinleri parçalayabilen farklı bir tripsin sınıfına aittir. Karşılık gelen kısımdaki proteinin çözülmesiyle, proteinler arasındaki bağlantı noktasındaki protein çözünür ve hücre, kendi iç yapısının hücre çerçevesinin destek kuvveti nedeniyle küresel hale gelir ve böylece hücreleri ayırır. Tripsin sindirim seviyesi, hücre şekillendirmede önemli bir faktördür: aşırı sindirim, hücre döküntüsünü artırır, siyah döküntü artar, hücreler bir bütün olarak düşerek hücre canlılığını ciddi şekilde tehlikeye atar ve bazı hücreler, atılan tripsin Çıkışı ile birlikte yüzer; Sindirim yeterli değilse, hücrelerin şişenin iç duvarından aşağı doğru üflenmesi zordur ve sürekli üfleme ve dövme hücre aktivitesine de zarar verir.
hücre kültürü şişesi
Serum protein kültürü solüsyonu şişesi
Farklı kurum veya hücrelerde pankreas enzimlerinin etkisi aynı değildir. Pankreas enzimi dağılmış hücrelerin aktivitesi de konsantrasyon değeri, sıcaklık ve etki süresi ile ilişkilidir. pH 8.0 ve sıcaklık 37 olduğunda, pankreatik enzim sulu solüsyonunun etkinlik seviyesi nispeten güçlüdür. Tripsin uygulanırken aşırı sindirimden kaynaklanan hücre hasarını önlemek için konsantrasyon, sıcaklık ve süre iyi kontrol edilmelidir. Ca2, Mg2 ve serum proteini, protein gramları pankreatinin aktivitesini azalttığından, sulu pankreatin solüsyonu hazırlarken Ca2, Mg2 içermeyen BSS kullanın, örneğin: D-Hanks solüsyonu. Sindirimi durdururken, tripsin'in hücreler üzerindeki etkisini durdurmak için serum protein hücre kültürü ortamı veya tripsin geciktirici ile tripsin durdurulabilir.
kültür şişesi
T25 hücre kültürü şişesi
Ayrıca yeni alınan bir hücre ise daha düşük bir tripsin konsantrasyonu kullanarak önce sindirim süresini araştırabilir ve hücrelerin her dakika yuvarlak olup olmadığını gözlemleyebilir ve iyi bir kayıt yapabilirsiniz. Sonuç olarak, hücre kültürü şişesindeki hücreleri elde ederken, hücrelerin yaşayabilirliğini etkili bir şekilde sürdürmek için tripsinizasyon süresinin kontrol edilmesi gereklidir.
