Nükleik asit tespiti prensibi
Bu kit, yeni koronavirüs (2019-nCoV) gen rekombinant antijeni ile önceden kaplanmıştır.
plaka ve ELISA dolaylı yöntemi kullanılarak bir işaretleyici olarak enzim etiketli anti-insan IgA monoklonal antikoru ile
İnsan serumunda yeni koronavirüs (2019-nCoV) IgA antikorunu kalitatif olarak tespit etmek.
Reaksiyon kompleksi TMB substratına eklendikten sonra reaksiyon sonlandırıldı ve her kuyunun OD'si 450 nm dalga boyunda ölçüldü.
OD değerinin boyutu, saptanacak antikorun içeriği ile orantılıdır.
【Örnek gereksinimler】
1. Taze kan örnekleri kullanın. Saklamanız gerekiyorsa, 2~8 derecede 48 saat soğutabilir veya -20 derecede dondurabilirsiniz.
canlı. Tekrar tekrar dondurup çözdürmekten kaçının (3 defadan fazla).
2. Çözünür, bulanık veya yağlı numuneler kullanmaktan kaçının.
3. Numunenin taşınması gerekiyorsa, 2~8 derecede tutulmalı veya dondurulmalıdır.
4. Test sonuçlarını etkilememek için numuneye pıhtılaşma önleyici maddeler veya koruyucu maddeler veya koruyucu maddeler eklemekten kaçının.
【Muayene yöntemi】
1. Kiti buzdolabından çıkarın ve oda sıcaklığına (15 dakika) ayarlayın, önceden kaplanmış reaksiyonu çıkarın
bindirilmeli ve paketten çıkarılmalıdır. Kullanım için konsantre yıkama solüsyonunu distile veya deiyonize su ile 1:30 oranında seyreltin.
2. Numune seyreltmesi: Test edilecek numuneyi numune seyrelticisi 1:100 (numune 2uL---numune) ile seyreltin.
Diluent 200uL), iyice karıştırın (veya doğrudan plaka kuyusunda seyreltin, yani plaka kuyusuna 200ul örnek seyreltici ekleyin, 2ul numune ekleyin ve karıştırın).
3. Numune ekleyin: 100 uL seyreltilmiş numuneyi plağın kuyusuna ekleyin (plaka kuyusunda seyreltilmişse, bu adım gerekli değildir).
adım). Her kuyuya bir negatif ve pozitif kontrol (100uL/kuyu, seyreltilmemiş) ayarlayın ve bir boş kontrol kuyusu kurun
(100uL numune seyreltici ekleyin), çalkalayın ve karıştırın.
4. Kuluçka: 37 derecede 30 dakika. Kuyudaki sıvıyı çalkalayın, plakayı her seferinde yıkama solüsyonu ile 3 kez yıkayın.
30 saniye bekledikten sonra delikteki sıvıyı silkeleyin ve emici kağıt üzerine hafifçe vurarak kurutun.
5. Enzim konjugatı ekleyin: Kuyu başına 2 damla (veya 100uL), iyice karıştırın ve 20 dakika 37 derecede inkübe edin. Yukarıdaki gibi 3 kez yıkayın ve kurulayın.
6. Renk geliştirme: her bir kuyucuğa bir damla renk geliştirici A ve B (veya her biri 50 uL) ekleyin, çalkalayın ve iyice karıştırın, 37'ye ayarlayın
10 dakika inkübe edin.
